基于CRISPR/Cas9技术的大白菜内源硫化氢生成酶LCD基因突变体构建

摘要 : 硫化氢(hydrogen sulfide, H2S)是植物细胞内源信号分子, 对植物的生长、发育和抗逆 性具有重要的调节作用。L-半胱氨酸脱巯基酶(L-cysteine desulfydrase, LCD)是合成内源H2S的关 键酶。大白菜(Brassica campestris)是我国北方主要的蔬菜。为研究H2S信号在大白菜中的生理作用, 并为育种工作提供新材料, 该研究采用CRISPR/Cas9基因编辑技术对白菜LCD基因进行了敲除。利 用农杆菌(LBA4404)介导的遗传转化法将基因编辑载体pYAO-LCD成功转化大白菜“中白60”, 获得 基因编辑的遗传转化植株4株。DNA测序表明, 基因编辑后植株在靶标位点的碱基发生了相应的 基因编辑。基因编辑植株中内源H2S含量有不同程度的降低。