CLIC1干扰线粒体动力学平衡促进内皮细胞损伤的研究

摘要 : 该文通过研究H2O2诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中氯离子通道蛋白1(chloride intracellular channel 1, CLIC1)对线粒体动力学平衡的影响, 探讨CLIC1在内皮细胞损伤中的作 用及机制。体外培养HUVEC细胞, 分别用CLIC1抑制剂IAA94(40 μmol/L)、H2O2(0.9 mmol/L)、 IAA94(40 μmol/L)和H2O2(0.9 mmol/L)联合处理, 荧光法检测细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)的含量; JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位的变化; 定量 PCR技术检测CLIC1、线粒体动力相关蛋白1(dynamin-related protein 1, Drp1)以及线粒体融合蛋白 1(mitofusin 1, Mfn1)的mRNA表达; 免疫印迹技术检测CLIC1、Drp1蛋白的水平。结果显示: 与正 常组相比, H2O2处理的内皮细胞中ROS、MDA含量增加(P<0.05), CLIC1表达量上调(P<0.05), 三 磷酸腺苷(ATP)含量减少(P<0.05), 线粒体膜电位降低(P<0.001), 线粒体融合蛋白Mfn1表达显著降 低(P<0.05), 线粒体分裂蛋白Drp1表达显著升高(P<0.05); 而IAA94预处理2 h后, 内皮细胞中ROS、 MDA含量减少(P<0.05), 线粒体融合蛋白Mfn1表达显著增加(P<0.05), 线粒体分裂蛋白Drp1表达显 著降低(P<0.05), 线粒体膜电位升高(P<0.001)。以上结果表明, CLIC1在H2O2诱导的内皮细胞线粒 体损伤中发挥重要作用, 其机制可能与CLIC1干扰线粒体动力学平衡有关。