GLP-1类似物活性检测细胞模型的建立及其功能分析

为探索GLP-1类似物活性检测模型在活性检测过程中影响稳定性与重复性的因素, 该 文以中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary, CHO)细胞为模型细胞, 构建真核表达载体pEGFP-N1/ hGLP-1R-EGFP, 并将其转染至CHO中, 经过G418抗性筛选和流式细胞仪分选富集后有限稀释, 筛 选获得一株稳定高表达的单克隆细胞株。倒置荧光显微镜分析、流式细胞术分析以及RT-PCR实 验结果显示, 此检测模型转录和翻译了hGLP-1R-EGFP基因, 并且表达的受体蛋白质位于细胞膜 侧。以利拉鲁肽和艾塞那肽作为模型药物进行活性检测分析, 结果显示, 该检测模型具有极高的药 物灵敏度, 不同代数模型细胞测活相对稳定。该文还进一步探索了影响GLP-1类似物EC50测量值的 因素, 主要包括模型细胞受体表达量、胎牛血清以及其单一组分BSA。综上所述, 构建的细胞模型 在检测GLP-1类似物活性中, 具有较好的稳定性和可重复性, 为GLP-1类似物的药物筛选与活性评 价提供方便可靠的模型基础。