去棕榈酰化修饰下G蛋白偶联受体激酶6核定位信号鉴定

黄希仕1 李瑞瑞1 黄岚珍1,2 阳晶1,2 吴群英1,3 蒋晓山1,4*

1桂林医学院, 细胞信号转导实验室, 桂林 541004; 2桂林医学院, 科学实验中心, 桂林 541004; 3桂林医学院, 细胞与遗传教研室, 桂林 541004; 4桂林医学院, 研究生学院, 桂林 541004

摘要 :

G蛋白偶联受体激酶6(G protein-coupled receptor kinase 6, GRK6)依赖去棕榈酰化修饰及特定核定位序列(nuclear localization sequence, NLS)实现胞核定位, 但NLS的关键基团及其对激酶活性的影响尚不清楚。该研究首先通过构建一系列缺失突变子, 初筛去棕榈酰化条件下GRK6的 NLS结构域; 然后采用点突变技术进一步确定NLS结构域中Lys(K)389、Lys(K)390、Lys(K)3913个关键基团; 最后通过检测内源性毒蕈碱M3受体介导的细胞内钙流, 证实NLS突变子对M3受体介导的细胞内钙流信号的抑制作用无明显影响。该研究为进一步揭示GRK6胞核转运机制及其功能提供了有价值的信息。