早期乳腺癌患者化疗前后外周血T细胞TCR β CDR3组库动态变化特征

该文采用高通量测序(high-throughput sequencing, HTS)技术分析早期乳腺癌患者化疗前后外周血T细胞TCR β CDR3(T-cell receptor beta chain complementarity determining region 3)组 库的组成及动态变化特征, 初步探讨化疗对T细胞的可能影响及化疗前后患者T细胞的应答功能状态。以病理活检确诊为T1N0M0期乳腺癌患者为研究对象, 选取进行6期TAC[多西他赛(docetaxel, T)、吡柔比星(pirarubicin, A)、环磷酰胺(cyclophosphamide, C)]化疗方案。化疗的3例志愿患者 (P1、P2、P3)分别于化疗前、第3期化疗后、第6期化疗后采集外周血分选出单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells ,PBMCs), 提取其总DNA; 利用多重PCR建立TCR β CDR3组库进行HTS; 采用Immuno SEQ和IMGT-High-V-quest系统对TCR β CDR3序列进行组成和特征分析。结果表明: (1) P1、P2、P3在第3期化疗后的CDR3组库多样性[用反辛普森指数(1/DS)表示]相比化疗前均升高; 第 6期化疗后, P1和P3相比第3期化疗后CDR3组库多样性降低, 但P2相比第3期化疗后CDR3组库多样性升高; (2)P1和P3在第3期化疗后CDR3组库高频克隆(大于1%)较化疗前出现降低, 而第6期化疗后 CDR3组库高频克隆相比第3期化疗后明显升高; P2第3期化疗后和化疗前相比CDR3组库高频克隆无变化, 但第6期化疗后明显降低; (3)P1和P2化疗前后出现部分TRBV基因取用丢失与重新取用, P3 的TRBV基因取用未发生明显改变; P2和P3化疗后部分TRBV与TRBJ优势配对消失。早期乳腺癌患者TAC化疗的前、中、后期, 其外周血T细胞TCR β CDR3组库表现出个体化的多样性和特征性改变, 可能与TAC对个体T细胞的抑制或杀伤相关。监测CDR3组库的组成及动态变化可为化疗对T细胞的影响及化疗前后“个体化”的T细胞免疫状态评估提供基础。