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自噬抑制剂3-MA对围着床期小鼠子宫胚胎着床的影响


陈梦月 高茹菲 李 娜 苏 燕 陆思宇 龙 菁 何俊琳 陈雪梅 刘学庆 丁裕斌 王应雄*

重庆医科大学公共卫生与管理学院生殖生物学研究室, 重庆医科大大学生殖与发育国际合作联合实验室, 重庆 400016
摘要 :

该文探索了自噬抑制剂3-MA对围着床期小鼠子宫胚胎着床的影响。将成年昆明雌性小鼠随机分为对照组、3-MA低剂量组(15 mmol/L)和3-MA高剂量组(30 mmol/L)。自小鼠孕D1起, 腹腔注射自噬抑制剂3-MA, 直到处死, 以腹腔注射PBS作为对照。收集孕D4、D5、D6子宫内膜组织, Western blot检测自噬抑制剂3-MA注射后自噬相关因子Atg5和LC3蛋白表达, 形态学观察对照组和 3-MA自噬抑制剂组胚胎着床点数量。Real-time PCR检测CathepsinB、P62、孕激素受体(PR)和雌 激素受体α(ERα) mRNA在孕D5子宫内膜的表达。免疫组化检测PR在孕D5子宫内膜的表达。结果显示, 在自噬抑制剂3-MA的作用下, 自噬相关因子Atg5、LC3蛋白在孕D4~D6小鼠子宫中的表达量明显降低, CathepsinB、P62 mRNA在孕D5小鼠子宫中的表达显著降低。注射3-MA自噬抑制剂后, 孕D6小鼠着床点(IS)数量比正常组明显减少。在孕D5小鼠子宫内膜着床旁(IIS)和着床点中, 自噬抑制剂3-MA干预组PR的蛋白质表达量明显降低, PR和ERα mRNA表达量均显著降低, 随着3-MA 抑制剂剂量的升高, PR和ERα mRNA表达降低得更显著。结果表明, 自噬抑制剂3-MA可能会对小鼠胚胎着床时子宫内膜容受性产生影响, 其机制有待进一步研究。