SIRT2对裸鼠原位肝癌生长和肺转移的影响及其机制研究

摘要 : 该文旨在探讨沉默信息调节因子2(silent information regulator 2, SIRT2)基因敲低对裸鼠原位肝癌生长和肺部转移的影响。应用杀稻瘟菌素筛选构建稳定敲低SIRT2基因的SK-Hep-1细胞, 应用定量逆转录PCR(qRT-PCR)和Western blot检测其敲低效率。将稳定敲SIRT2基因的细胞(SIRT2-shRNA-SK-Hep-1)和对照组细胞(shCont-SK-Hep-1)原位注入裸鼠肝脏, 8周后处死裸鼠并取出肝脏和肺组织, 比较两组裸鼠肝癌肿瘤的大小及肺转移结节的数量。应用Western blot和免疫组织化学检测两组裸鼠肝癌组织中SIRT2、p-AKT、AKT、p-GSK3β、GSK3β、active β-catenin和β-catenin的蛋白质水平。结果显示, 稳定敲低SIRT2基因的SK-Hep-1细胞系构建成功。裸鼠原位肝癌肺转移模型中, 相比shCont-SK-Hep-1组, SIRT2-shRNA-SK-Hep-1组裸鼠原位肝癌体积减小(P<0.05), 肺转移结节数量明显减少(P<0.05)。Western blot结果表明, 敲低SIRT2基因的裸鼠组p-AKT、p-GSK3β、active β-catenin、β-catenin蛋白质水平降低, GSK3β水平升高, AKT水平无差异; 免疫组织化学结果表明, 敲低SIRT2基因的裸鼠组p-AKT、p-GSK3β、β-catenin蛋白质水平降低。本研究结果提示, 在裸鼠原位肝癌肺转移模型中, 敲低SIRT2基因可以通过激活AKT的表达影响GSK3β/β-catenin信号通路, 从而抑制人肝癌细胞的生长和肺转移。