糖尿病肾病患者尿源性干细胞的分离鉴定及与健康人尿源性干细胞的细胞生物学比较研究

陶立1,2 马文军1,2 龚梦嘉2 毕杨2 魏光辉1,2 张元原1,2*

1 重庆医科大学附属儿童医院泌尿外科, 重庆 400014; 2 重庆医科大学附属儿童医院, 儿科研究所干细胞实验室,儿童泌尿生殖发育与组织工程重庆市重点实验室, 儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室,儿科学重庆市重点实验室, 重庆市(儿童发育重大疾病诊治与预防)国际科技合

摘要 : 干细胞移植是糖尿病肾病新的治疗途径, 但异种干细胞存在伦理及免疫排斥等问题。该研究从糖尿病肾病患者尿液中提取出一种类似干细胞的细胞, 称之为糖尿病病人尿源性干细胞(USCs from patients with diabetic nephropathy, D-USCs), 并比较了与健康人尿源性干细胞(urine derived stem cells, USCs)生物学特性的差异。通过观察细胞形态, 流式细胞术检测细胞表面标志物,茜素红及油红O染色分别检测成骨和成脂分化潜能, 以鉴定其干细胞特性。通过绘制生长曲线比较D-USCs与USCs增殖能力, 人促血管生成因子检测试剂盒检测细胞外分泌因子的表达情况, 流式细胞术检测细胞凋亡率的差异。结果表明, 此类细胞可以在体外分离培养, 连续传代生长, 细胞形态保持米粒状, 表达间充质干细胞标志物(包括CD 24、CD 29、CD 73、CD 90、CD 105)、周细胞标志物(CD 146), 不表达造血干细胞标志物(包括CD 31、CD 34、CD 45), 具有成骨和成脂分化的潜能。与USCs相比, D-USCs的增殖能力受到损伤, 分泌因子种类基本保持一致, 但数量上有所减少,细胞凋亡率升高。综上所述, 该研究成功从糖尿病肾病病人尿液中提取出尿源性干细胞, 为干细胞移植治疗肾损害提供了可能的新的细胞来源, 避免了异体免疫排斥反应。