HOXA7促进宫颈癌细胞体外增殖的实验研究
陈 军1,2,3 李跃辉1,2 刘朝阳1,2 李文玲1,2 杨小会4,5* 李官成1,2*
1 中南大学湘雅医院, 卫生部癌变原理重点实验室及教育部癌变与侵袭原理重点实验室, 长沙 410008;
2 中南大学肿瘤研究所, 长沙 410078; 3 湖南环境生物职业技术学院, 衡阳 421005;
4 中南大学公共卫生学院, 长沙 4100
2 中南大学肿瘤研究所, 长沙 410078; 3 湖南环境生物职业技术学院, 衡阳 421005;
4 中南大学公共卫生学院, 长沙 4100
摘要 : 该研究敲低同源盒基因A7(homeobox genes A7, HOXA7)后, 研究宫颈癌细胞Siha、Caski体外增殖的影响。将HOXA7基因的si-RNA稳定转染至Siha、Caski细胞; RNA干扰的效果采用RT-
PCR、Western blot进行鉴定; 细胞生长速度采用MTT法、细胞倍增时间实验来进行检测; 平板克隆形成实验检测细胞接种的存活率; 流式细胞术检测细胞周期。RNA干扰结果显示, 敲低HOXA7基因后, Siha、Caski细胞中HOXA7表达下调。MTT结果显示, 实验组Siha/si-HOXA7、Caski/si-HOXA7细胞生长速度明显下降。研究发现, 对照组细胞Siha/NC、Caski/NC与实验组细胞Siha/si-HOXA7、Caski/si-HOXA7的平均倍增时间为分别为5.652±0.352 h、4.650±0.340 h、7.342±0.331 h和6.987±0.330 h; 对照组细胞Siha/NC、Caski/NC与实验组细胞Siha/si-HOXA7、Caski/si-HOXA7的克隆形成率分别为35.400%±1.429%、31.700%±1.943%、24.200%±1.098%和21.200%±1.838%。分别与对照组细胞Siha/NC、Caski/NC比较, 实验组细胞Siha/si-HOXA7、Caski/si-HOXA7增殖、倍增时间和克隆形成能力差异极显著(P<0.01)。实验组细胞周期也发生改变: G 1 期细胞增多、S期细胞减少。这说明, HOXA7基因可以促进宫颈癌细胞Caski、Siha的增殖, 这为进一步探索HOXA7基因的功能及研究宫颈癌的发病机制打下了坚实的基础。
PCR、Western blot进行鉴定; 细胞生长速度采用MTT法、细胞倍增时间实验来进行检测; 平板克隆形成实验检测细胞接种的存活率; 流式细胞术检测细胞周期。RNA干扰结果显示, 敲低HOXA7基因后, Siha、Caski细胞中HOXA7表达下调。MTT结果显示, 实验组Siha/si-HOXA7、Caski/si-HOXA7细胞生长速度明显下降。研究发现, 对照组细胞Siha/NC、Caski/NC与实验组细胞Siha/si-HOXA7、Caski/si-HOXA7的平均倍增时间为分别为5.652±0.352 h、4.650±0.340 h、7.342±0.331 h和6.987±0.330 h; 对照组细胞Siha/NC、Caski/NC与实验组细胞Siha/si-HOXA7、Caski/si-HOXA7的克隆形成率分别为35.400%±1.429%、31.700%±1.943%、24.200%±1.098%和21.200%±1.838%。分别与对照组细胞Siha/NC、Caski/NC比较, 实验组细胞Siha/si-HOXA7、Caski/si-HOXA7增殖、倍增时间和克隆形成能力差异极显著(P<0.01)。实验组细胞周期也发生改变: G 1 期细胞增多、S期细胞减少。这说明, HOXA7基因可以促进宫颈癌细胞Caski、Siha的增殖, 这为进一步探索HOXA7基因的功能及研究宫颈癌的发病机制打下了坚实的基础。
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