大黄素对宫颈癌Hela细胞端粒损伤作用的研究

摘要 : 该文探究了抗肿瘤药物、化疗增敏剂大黄素对人宫颈癌Hela细胞端粒和端粒酶活性的影响。利用磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)免疫荧光–端粒荧光原位杂交技术检测端粒区特异性DNA损伤水平。利用中期染色体–端粒荧光原位杂交技术检测端粒异常信号, 包括多端粒信号(multitelomeric signals, MTSs)和端粒信号缺失(signal free ends, SFEs)。利用荧光定量PCR方法和端粒重复扩增程序分别检测端粒相对长度和端粒酶活性。结果显示, 与0 mol/L对照组相比, 20 μmol/L大黄素处理Hela细胞48 h能够诱导端粒长度缩短至80%, 同时还发现端粒功能障碍损伤灶(telomere dysfunction induced foci, TIFs)和端粒异常信号增多, 包括MTSs由1.65%增加至3.98%(P<0.01)、SFEs由2.74%增加至8.49% (P<0.01)。同时, 结果还发现, 大黄素处理后, Hela细胞端粒酶活性显著升高, 10 μmol/L和20 μmol/L大黄素处理48 h后, 端粒酶活性分别升高为对照组的1.42倍(P<0.05)和1.92倍(P<0.01)。综上, 实验结果表明, 大黄素的急性暴露能够引起端粒功能障碍以及端粒酶活性升高, 后者可能与端粒损伤后修复有关。