低氧条件下沉默HIF-1α与TNF-α、IL-6的相关性研究及人真皮微血管内皮细胞生物学行为的变化

摘要 : 该文探讨了低氧条件下沉默缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素-6(interleukin-6, IL-6)的相关性及人真皮微血管内皮细胞生物学行为的变化。采用三气培养箱培养人真皮微血管内皮细胞, 根据时间和氧浓度分组, 确定最适培养时间及缺氧浓度。同时, 构建靶向HIF-1α的腺病毒并感染人真皮微血管内皮细胞, 分为对照组、空载组和沉默组。应用RT-PCR和Western blot检测HIF-1α、TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白质水平。Transwell检测细胞迁移能力, 流式细胞技术观察细胞凋亡及细胞周期变化。结果显示, 缺氧条件下, HIF-1α、TNF-α和IL-6的表达随缺氧时间延长而增加, 随氧浓度降低而增加。与对照组相比, 沉默组的细胞迁移能力(P<0.01)及周期(P<0.01)均明显抑制, 细胞凋亡明显增加(P<0.01)。与对照组相比, 沉默组TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白质水平均减少(P<0.01)。由此可见,缺氧条件下, HIF-1α、TNF-α和IL-6的表达呈时间依赖性和氧浓度递减依赖性。人真皮微血管内皮细胞HIF-1α的表达与炎性因子TNF-α、IL-6具有明显的正相关。沉默HIF-1α后, 能明显抑制细胞增殖, 抑制细胞迁移, 促进细胞凋亡。