一种新方法获取颞下颌关节骨关节病患者滑膜间充质干细胞及细胞培养鉴定

胡程晨^1,2 方泽强¹ 冯驰¹ 庞谅^1,2 任为^1,2 邱丽华^1*

¹重庆医科大学附属口腔医院口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室, 重庆 401147;²重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室, 重庆 401147

摘要 : 该研究探讨从颞下颌关节骨关节病患者的关节冲洗液中获取滑膜间充质干细胞(synovial mesenchymal stem cells, SMSCs)并进行体外培养, 研究其间充质干细胞特性。采用离心、贴壁培养法从颞下颌关节骨关节病患者的关节冲洗液中提取并分离细胞, 进行细胞形态学观察、细胞生长及周期的分析, 细胞表面物标志物流式细胞术检测, 间充质干细胞标志物免疫荧光检测, 成骨、成脂、成软骨多向分化能力检测, 促血管分泌因子检测。结果显示, 通过离心、贴壁培养法可稳定地从患者颞下颌关节冲洗液中获取滑膜间充质干细胞, 体外培养呈对数生长。SMSCs表达间质源性细胞的特异性标记物CD73、CD90、CD105、波形蛋白(Vimentin)以及α平滑肌肌动蛋白的特异性标记物α-SMA。经诱导培养基诱导, SMSCs可分化为骨、软骨和脂肪细胞, 细胞分泌液中可检测到如成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor, FGF)、angiopoietin、转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)等10余种促血管生长因子。以上结果表明, 该研究成功建立了以微创的方式获取颞下颌关节骨关节病患者的滑膜间充质干细胞, 有望为组织工程应用于骨软骨修复提供良好种子细胞的来源。