氢化可的松对奶牛乳腺上皮细胞乳脂肪合成的影响
孙 梅 李大彪* 邢媛媛 张 花 王卫云 李子健
内蒙古农业大学动物科学学院, 呼和浩特 010018
摘要 : 该研究旨在探讨不同浓度的氢化可的松处理对奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary
gland epithelial cells, BMECs)增殖、甘油三酯(triglyceride, TAG)合成、脂滴的形成以及乳脂肪合成相关基因表达的影响。采用单因子随机实验设计, 以不添加氢化可的松组为对照组, 处理组的氢化可的松浓度分别为1、10、100、1 000 ng/mL。各组细胞处理24 h后, 通过四甲基偶氮唑盐(thiazoly blue tetrazolium, MTT)比色法检测细胞活力; 利用试剂盒检测胞内TAG的含量; 使用油红O染色法检测细胞内乳脂球的合成; 采用实时定量PCR法检测乳脂合成相关基因的表达。结果表明, 氢化可的松处理对BMECs增殖无显著影响(P>0.05); 与对照组相比, 100 ng/mL氢化可的松组能够显著提高TAG的合成量、增加胞内脂滴的形成以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor γ, PPARγ)的基因表达(P<0.05); 10 ng/mL和100 ng/mL氢化可的松组能够显著上调乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase, ACC)、二酰甘油酰基转移酶(diacylgycerol acyltransferase, DGAT)的基因表达(P<0.05); 1、10、100 ng/mL氢化可的松组能够显著上调脂肪酸合酶(fatty acid synthase, FASN)基因表达(P<0.05), 且1 ng/mL的促进效果最明显, 而1 000 ng/mL则显著抑制了FASN的表达(P<0.05)。该研究结果说明, 氢化可的松能够促进BMECs乳脂肪合成, 且100 ng/mL的剂量对乳脂合成的促进效果最佳。
gland epithelial cells, BMECs)增殖、甘油三酯(triglyceride, TAG)合成、脂滴的形成以及乳脂肪合成相关基因表达的影响。采用单因子随机实验设计, 以不添加氢化可的松组为对照组, 处理组的氢化可的松浓度分别为1、10、100、1 000 ng/mL。各组细胞处理24 h后, 通过四甲基偶氮唑盐(thiazoly blue tetrazolium, MTT)比色法检测细胞活力; 利用试剂盒检测胞内TAG的含量; 使用油红O染色法检测细胞内乳脂球的合成; 采用实时定量PCR法检测乳脂合成相关基因的表达。结果表明, 氢化可的松处理对BMECs增殖无显著影响(P>0.05); 与对照组相比, 100 ng/mL氢化可的松组能够显著提高TAG的合成量、增加胞内脂滴的形成以及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor γ, PPARγ)的基因表达(P<0.05); 10 ng/mL和100 ng/mL氢化可的松组能够显著上调乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase, ACC)、二酰甘油酰基转移酶(diacylgycerol acyltransferase, DGAT)的基因表达(P<0.05); 1、10、100 ng/mL氢化可的松组能够显著上调脂肪酸合酶(fatty acid synthase, FASN)基因表达(P<0.05), 且1 ng/mL的促进效果最明显, 而1 000 ng/mL则显著抑制了FASN的表达(P<0.05)。该研究结果说明, 氢化可的松能够促进BMECs乳脂肪合成, 且100 ng/mL的剂量对乳脂合成的促进效果最佳。
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