肌动蛋白结合蛋白对肝癌细胞迁移与侵袭能力的影响及其机制研究

摘要 : 该文旨在探讨肌动蛋白结合蛋白(actin-binding protein, ANLN)对肝癌细胞迁移与侵袭能力的影响。应用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ANLN在肝癌组织和癌旁组织中的表达差异, 运用慢病毒介导shRNA干扰技术靶向敲低肝癌细胞Huh-7中ANLN的表达, 并通过qRT-PCR和Western blot方法验证敲低效率; 通过细胞迁移实验和侵袭实验检测肝癌细胞的迁移与侵袭能力。进一步通过qRT-PCR和Western blot检测ANLN基因敲低对基质金属蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9, MMP9)mRNA和蛋白质水平的影响。最后, 分析MMP9在ANLN敲低调控的肝癌细胞迁移侵袭过程中的作用。结果显示, 在20例肝癌组织样本和癌旁组织中, ANLN在肝癌组织中mRNA水平较癌旁组织显著增高(P<0.001)。其中, 在发生转移的肝癌组织中, ANLN mRNA水平较无转移的肝癌组织显著增高(P<0.001)。慢病毒介导shRNA能显著抑制肝癌细胞中ANLN的表达, ANLN基因敲低能抑制肝癌细胞的迁移能力, 并能显著抑制肝癌细胞的侵袭能力。机制研究发现, ANLN的基因敲低能显著抑制MMP9的表达, MMP9的过表达能逆转ANLN基因敲低对肝癌细胞迁移侵袭能力的抑制作用。该研究结果提示, 在肝癌组织中, ANLN mRNA水平明显增高, ANLN的表达水平与迁移侵袭能力密切相关。ANLN基因敲低可能通过调节MMP9的表达, 从而抑制肝癌细胞的迁移侵袭能力。