谷氨酰胺激活PI3K/Akt信号通路促进痘苗病毒复制

许婉彬¹ 王娇娇^1* 陈健华² 周秀梅¹ 王如伟³ 方玲³ 阎辉⁴

¹浙江理工大学生命科学学院新元医学与生物技术研究所, 杭州 310008; ²上海交通大学医学院附属仁济医院,上海市肿瘤研究所, 上海 200032; ³浙江康恩贝制药股份有限公司, 杭州 310018; 4浙江省医学科学院, 杭州 310013

摘要 : 谷氨酰胺(glutamine, Gln)在细胞生长和代谢过程中起重要作用, 能够激活磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)/哺乳动物雷帕霉素蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)信号通路。多种病毒能通过PI3K/Akt信号通路维持细胞生存和抑制细胞凋亡, 维持病毒的感染。为了探讨Gln在痘苗病毒(vaccinia virus strain western reserve, WR)感染人肺癌细胞A549过程中的调控作用及其潜在机制, 该文通过蛋白免疫印迹(Western blot)检测PI3K/Akt信号通路蛋白质磷酸化水平, 流式细胞术检测细胞阳性率, 结晶紫染色检测WR滴度, 实时定量PCR(quantitative Real-time PCR, qPCR)检测WR基因E3L和A46R mRNA水平。结果显示, Gln处理后PI3K/Akt信号通路蛋白质磷酸化水平显著升高。抑制PI3K/Akt信号通路后, 细胞阳性率显著降低(P<0.05), WR滴度显著降低(P<0.05), WR基因E3L和A46R mRNA水平显著降低(P<0.05)。该研究结果表明, Gln通过激活PI3K/Akt信号通路从而促进A549细胞中WR的复制。