施氏鲟不同组织来源细胞离体培养的初步研究

孟　彦　张　燕³　张　林^1,2　肖汉兵¹　李罗新³　杨焱清¹　曾令兵^1,2,3*

¹中国水产科学研究院淡水生态与健康养殖重点开放实验室, ²中国水产科学研究院长江水产研究所鱼类病害研究室, ³农业部淡水鱼类种质资源与生物技术重点开放实验室, 荆州 434000

摘要 : 采用组织块移植培养技术，对来源于施氏鲟(Amur sturgeon， Acipenser schrencki Brandt)肝脏、脾脏、肾脏、鳍条和心脏组织的细胞进行了原代培养， 2~3天左右可见组织块周围有成纤维样细胞迁出， 10天左右组织块周围形成单层细胞。对原代培养的单层细胞用胰蛋白酶-EDTA消化后传代培养，建立了可连续传代的施氏鲟肝脏、脾脏、肾脏、心脏组织细胞系。初步确立施氏鲟细胞培养的条件，培养基为MEME，培养温度为25 ℃，血清浓度为20%。对传代培养细胞以二甲基亚砜为保护剂在液氮冷冻保存，细胞复苏后可连续传代培养。施氏鲟细胞离体培养为开展鲟鱼病毒病和遗传资源保存研究提供了重要试验材料。