gma-miR1507a生物信息学分析、植物表达载体的构建及遗传转化

摘要 : miRNA(microRNA)是一类长度为18~25 nt的内源性非编码小分子RNA, 通过对其靶基因mRNA的降解或抑制翻译来调控基因表达, 进而参与调控植物相关的生理活动。该研究分析gma-miR1507a的成熟体序列、茎环结构和前体启动子区域的顺式作用元件并检测了逆境处理下大豆组织中gma-miR1507a的水平; 使用psRNATarget在线软件预测了gma-miR1507a的靶基因; 构建植物表达载体amiRNA1507a-pCAMBIA2301并转化大豆子叶, 获得了发状根。结果发现, gma-miR1507a前体的启动子区域存在与干旱胁迫和病菌侵染相关的顺式作用元件; 在线软件psRNATarget预测到9个gma-miR1507a的靶基因; 该研究利用发状根介导的遗传转化结合GFP染色,确定阳性发状根; 在转基因根毛中, gma-miR1507a水平与空载相比显著提高, 预测的部分靶基因表达量显著下调。以上结果显示, 过表达amiRNA1507a能够提高大豆发状根中gma-miR1507a水平,为研究gma-miR1507a的功能奠定基础。同时, gma-miR1507a可能参与调控大豆的逆境胁迫。