微重力培养条件对造血干祖细胞分化为功能成熟的中性粒细胞的影响
王哲哲 张潇予 张苏东 谢忻琰 刘 鹏 相 菲 任 仟 谢雪梅 郭荣霞 刘 飞 王 彤 许元富*
中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所), 实验血液学国家重点实验室, 天津 300020
摘要 : 该文采用旋转培养方式研究微重力培养条件对造血干祖细胞向中性粒细胞分化的效率和功能的影响。脐血CD34+细胞用扩增体系[StemSpan SFEM培养基、干细胞因子(stem cell
factor, SCF)、Fms相关酪氨酸激酶3受体(Fms-related tyrosine kinase 3 ligand, Flt3)、血小板生成素(thrombopoietin, TPO)、白细胞介素-3(interleukin-3, IL-3)]静置培养7 d后, 再分成静置培养(static culture, SC)组和旋转培养(rotate cell culture system, RCCS)组, 并换为分化培养体系[StemSpan SFEM培养基、IL-6、粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor, G-CSF)、SCF、Flt3、IL-3]再培养9 d。培养过程中用流式细胞术检测CD34、CD38、CD11b、CD16b、CD66b比例,第16 d收集细胞进行中性粒细胞功能检测。结果表明, RCCS组和SC组均能形成形态正常和功能
成熟的中性粒细胞, RCCS组CD16b+的中性粒细胞比例显著增多(29.82%±2.48% vs 15.01%±0.62%,P<0.01), 且细胞产生活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)的能力显著增强(P<0.05), 具有趋化运动能力的细胞增多(50.430%±3.275% vs 34.000%±0.700%, P<0.05)、运动速度增快(8.100±0.404 μm/minvs 5.850±0.050 μm/min, P<0.05)。该文结果提示, 微重力培养条件能促进造血干祖细胞分化为形态正常和功能成熟的中性粒细胞。
factor, SCF)、Fms相关酪氨酸激酶3受体(Fms-related tyrosine kinase 3 ligand, Flt3)、血小板生成素(thrombopoietin, TPO)、白细胞介素-3(interleukin-3, IL-3)]静置培养7 d后, 再分成静置培养(static culture, SC)组和旋转培养(rotate cell culture system, RCCS)组, 并换为分化培养体系[StemSpan SFEM培养基、IL-6、粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor, G-CSF)、SCF、Flt3、IL-3]再培养9 d。培养过程中用流式细胞术检测CD34、CD38、CD11b、CD16b、CD66b比例,第16 d收集细胞进行中性粒细胞功能检测。结果表明, RCCS组和SC组均能形成形态正常和功能
成熟的中性粒细胞, RCCS组CD16b+的中性粒细胞比例显著增多(29.82%±2.48% vs 15.01%±0.62%,P<0.01), 且细胞产生活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)的能力显著增强(P<0.05), 具有趋化运动能力的细胞增多(50.430%±3.275% vs 34.000%±0.700%, P<0.05)、运动速度增快(8.100±0.404 μm/minvs 5.850±0.050 μm/min, P<0.05)。该文结果提示, 微重力培养条件能促进造血干祖细胞分化为形态正常和功能成熟的中性粒细胞。
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