异鼠李素诱导人结肠癌细胞凋亡及其分子机制的初步研究

摘要 : 该文研究异鼠李素(isorhamnetin, ISO)对人结肠癌细胞(LOVO)增殖和凋亡的影响, 并初步探讨其分子机制。采用MTT法检测不同浓度异鼠李素作用于LOVO 24、48、72 h后的细胞增殖; 采用PI染色法检测不同浓度异鼠李素处理LOVO 48 h后的贴壁细胞数; 采用碘化丙啶(propidium iodide, PI)染色法和DNA电泳的梯状条带(DNA ladder)法检测不同浓度异鼠李素处理LOVO 48 h后细胞形态和DNA片段; 采用Western blot法检测磷酸化的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor phosphorylation, pEGFR)、Bax(Bcl-2 associated X protein)、Bcl-2(B-cell lymphoma-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和caspase-3的剪切体(cleaved caspase-3)的蛋白质水平。结果发现, 异鼠李素能有效抑制LOVO的增殖, 且具有浓度和时间依赖性; 处理48 h后, 细胞出现了典型的凋亡形态, 且出现180~200 bp倍数的DNA片段。进一步研究发现, 异鼠李素通过抑制EGFR磷酸化、增加Bax蛋白质水平、减少Bcl-2蛋白质水平进而活化caspase-3, 实现诱导细胞凋亡并抑制细胞增殖。因此, 异鼠李素通过细胞凋亡抑制结肠癌细胞的增殖, 具有开发为人结肠癌临床治疗用药或辅助用药的潜力。