线粒体DNA单体型M8a对转线粒体细胞线粒体能量代谢的影响

摘要 : 为了观察线粒体DNA(mitochondrial DNA, mtDNA)单体型M8a对细胞线粒体能量代谢的影响, 该研究利用聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG)介导血小板–细胞融合技术, 构建mtDNA单体型M8a和G2a转线粒体细胞(transmitochondrial cytoplasmic hybrid cell, cybrid)模型。后续运用Real-time PCR检测细胞mtDNA拷贝数和RNA转录水平, 多功能酶标仪检测细胞活性氧类(reactive oxygen species, ROS)水平和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential, MMP), 线粒体呼吸测定仪检测细胞内源性氧呼吸(oxygen consumption, OC)情况。结果表明, 与G2a细胞相比, M8a细胞mtDNA拷贝数和线粒体轻链(L链)转录水平明显降低(P<0.01), 细胞基础耗氧量、ATP合成耗氧量、最大氧呼吸能力和MMP显著下降(P<0.05), 细胞ROS水平显著上升(P<0.05)。mtDNA单体型M8a细胞的线粒体呼吸功能受损, 可能增加了该单体型人群罹患2型糖尿病的风险。