恒河猴大脑皮质星形胶质细胞的原代培养及鉴定

王建斌^1,2 冯敏¹ 廖芸¹ 王丽春¹ 张莹¹ 范胜涛¹ 李琦涵^1*

¹中国医学科学院医学生物学研究所&北京协和医学院, 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室, 昆明 650118;
²中国医学科学院病原生物学研究所&北京协和医学院, 北京 100730

摘要 : 为建立有效纯度高的恒河猴星形胶质细胞体外培养体系, 无菌条件下取6月龄恒河猴婴猴的大脑皮质, 除去白质, 充分剪碎后机械吹打制成细胞悬液接种培养, 待原代培养的细胞长满培养皿后, 通过恒温摇床振荡和传代差速贴壁除去寡突胶质细胞、成纤维细胞等, 得到纯化后的星形胶质细胞, 并用GFAP-FITC(glial fibrillary acidic protein-fluorescein isothiocyanate)免疫荧光法对所获细胞进行鉴定。分离培养的细胞具备典型的星形胶质细胞形态, 并表达星形胶质细胞特异性抗原GFAP(glial fibrillary acidic protein), 纯化后获得了高纯度的恒河猴星形胶质细胞。采用该培养方法成功建立原代恒河猴星形胶质细胞培养体系, 为体外研究嗜神经性病毒、神经系统疾病及其相关中枢神经病理机制等提供了可靠的细胞模型。