miR-181a调控骨髓间充质干细胞中OPG水平及 对破骨细胞活性的影响

摘要 : 该研究预测并验证骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMMSCs)中miR-181a对靶分子骨保护素(osteoprotegerin, OPG)mRNA水平的调控作用, 探讨其在骨质疏松发病过程中对破骨细胞活性的影响。通过生物信息学预测miR-181a可能调控的靶基因OPG, 构建含miR-181a结合位点的OPG mRNA 3′UTR(3′ untranslated regions)荧光素酶报告载体。通过双荧光素酶载体系统检测miR-181a与OPG mRNA 3′UTR相互作用对荧光素酶活性的影响; 转染miR-181a进入BMMSCs并与破骨细胞共培养, TRAP(tartrate resistant acid phosphatase)染色检测共培养体系中破骨细胞数目的改变。结果表明, 双荧光素酶报告提示, miR-181a的靶分子为OPG mRNA, 上调miR-181a(mimics组)水平后, 破骨细胞数目较对照组显著增多(P<0.05); 下调miR-181a(inhibitor组)水平后, 破骨细胞数目较对照组显著降低(P<0.05)。研究结果显示, miR-181a可以负调控OPG的蛋白水平, 进而影响破骨细胞活性。