神经元单层细胞电镜原位包埋方法的探讨

摘要 : 为探究神经元单层细胞电镜原位包埋方法, 该研究以体外培养的大鼠皮层神经元单层细胞为材料, 采用了三种不同的方法进行样品制备。结果表明, 常规悬浮离心包埋法容易对细胞造成机械损伤, 且无法保持原位性; 培养在玻璃盖玻片上的细胞, 虽能保持较好的原位性, 但其超薄切片表层易破碎, 遇水溶解, 且在透射电镜下可见细胞整体衬度弱和超微结构不完整; 而培养在Thermanox塑料薄膜盖玻片上的细胞, 可容易观察到相邻细胞间的紧密连接, 超微结构清晰, 衬度较前组样品好, 三维重构之后可很好地显示神经元细胞之间的毗邻关系。因此, 相比前两种细胞制样方式, Thermanox塑料薄膜上单层细胞处理过程简便, 成功率高。该结果为神经元细胞超微结构的形态学研究进一步提供技术新思路, 并有望推动神经元细胞超微结构观察中三维重构技术和光镜/电镜联用技术的开发应用。