信号肽对肝细胞生长因子HGF在CHO中表达及分泌的影响

摘要 : 该研究旨在筛选不同的分泌型信号肽以提高肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)在中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell, CHO)中的表达。通过PCR方法将5种不同的分泌型信号肽代替HGF自身信号肽, 分别构建了表达质粒并转化哺乳动物细胞CHO, 挑选高表达克隆。采用qPCR方法检测表达过程中HGF转录水平差异, Western blot检测CHO培养基中HGF的累积差异, 犬肾细胞(Madin-Daby canine kidney cells, MDCK cells)离散实验初步验证HGF的活性。研究结果表明, 不同的分泌型信号肽对CHO表达HGF过程中的转录水平没有影响, 但明显改变HGF在培养基中的累积, 对分泌的HGF活性没有影响。综上所述, 合适的分泌型信号肽促进CHO分泌外源蛋白质。