淫羊藿苷对经血源性子宫内膜干细胞成心肌样细胞分化的影响

摘要 : 选择安全高效的诱导剂促进干细胞成心肌样细胞分化, 将为干细胞治疗心脏疾病提供更佳的种子细胞, 加强干细胞治疗效果。该研究重在明确淫羊藿苷(icariin, ICA)对经血源性子宫内膜干细胞(menstrual blood-derived endometrial stem cells, MenESC)成心肌样细胞分化的影响。首先, 通过MTT法和划痕实验检测ICA对MenESC增殖和迁移的影响。RT-PCR检测ICA与5氮杂胞苷(5azacytidine, 5azaC)诱导前后心肌特异性转录调控因子肌细胞增强因子-2C(myocyte enhancer factor-2C, MEF-2C)、 NK2转录因子相关蛋白5(NK2 transcription factor related locus 5, Nkx2.5)、GATA结合蛋白4(GATA binding protein 4, GATA4)以及心肌特异性标志物人类心房钠尿肽(humanatrial natriuretic peptide, hANP)、肌钙蛋白I(cardiac tropomin I, cTnI)、肌钙蛋白T(cardiac tropomin T,cTnT)基因的表达水平。免疫荧光检测ICA与5azaC诱导后细胞中cTnT的蛋白质水平表达。结果表明, ICA对MenESC的增殖和迁移无显著性影响; 进一步发现, ICA与5azaC诱导MenESC后, 均能显著上调MEF-2C、Nkx2.5、GATA4、hANP、cTnI及cTnT基因的表达; 而最终的免疫荧光结果也证实,ICA诱导后的MenESC阳性表达cTnT。综上所述, ICA可在不影响MenESC增殖和迁移活性的基础上促进其成心肌样细胞分化, 为MenESC在临床上治疗心脏疾病提供新途径。