儿童原发性肾病综合征患者尿源干细胞分离培养技术研究

石冬梅李昊张原元龚梦嘉阳海平杨宝辉王墨^* 李秋^*

重庆医科大学附属儿童医院肾脏内科, 儿童发育疾病研究教育部重点实验室,儿童感染免疫重庆市重点实验室, 儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地, 重庆 400014

摘要 : 该研究探讨建立儿童原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome, PNS)尿源干细胞(urine-derived stem cells from pediatric patients with PNS, p-USCs)分离培养技术。体外分离培养细胞, 进一步观察细胞形态、分析细胞生长曲线及细胞周期、检测细胞表面标志物表达。采用茜素红及油红O染色检测细胞成骨和成脂分化潜能。结果显示, 通过离心、贴壁方法从PNS患儿尿液中分离出的细胞, 外观米粒样并呈对数生长; 细胞表达间充质干细胞表面标志物CD24(cluster of differentiation 24)、CD29、CD73、CD90, 但少数细胞表达CD105, 周细胞标志物CD146表达阳性,造血干细胞标志物CD34表达阴性; 细胞经成骨成脂诱导后, 茜素红和油红O染色均呈阳性。以上结果表明, 该研究成功建立了PNS患儿p-USCs分离培养的方法, 为探讨p-USCs用于儿童PNS早期肾损伤的诊断及难治性肾病的治疗研究提供前期技术方法。