与骨髓基质细胞共培养前后的人急性髓系白血病细胞中N-糖链变化分析

摘要 : 骨髓基质细胞是骨髓微环境的重要组成部分, 在促进造血干细胞生成血细胞的各个环节中起重要作用。作为细胞结构重要组成部分的糖链(如N-糖链), 广泛参与了细胞之间的黏附、分化、增殖及信号转导等过程。为了探究骨髓微环境对血液细胞表面N-糖链变化的影响, 该研究使用人骨髓来源的基质细胞HS27a与急性髓系白血病细胞KG1a共培养的体外模型, 利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assistted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术从糖组学角度比较了与骨髓基质细胞共培养前后的KG1a细胞中N-糖链变化, 并结合实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和细胞凝集素染色对质谱结果加以验证。结果显示, 与HS27a共培养后的KG1a中高甘露糖型Man10GlcNAc2Asn结构N-糖链相对强度降低, 平分型、四天线复杂型和岩藻糖化的N-糖链相对强度增加, 合成相应糖链的MGAT5[mannosyl (α-1,6)-glycoprotein β-1,6-N-acetyl-glucosaminyltransferase]、MGAT3(mannosyl-glycoprotein β-1,4-N-acetylglucosaminyltransferase)和FUT8(fucosyltransferase 8)基因水平表达上调。细胞染色结果证明, 共培养后的KG1a对凝集素PHA-E+L(Phaseolus vulgaris Agglutinin)和LCA(Lens culinaris)的亲和作用增强。该研究从糖生物学角度揭示了骨髓来源的基质细胞对急性髓系白血病细胞在N-糖链变化上的影响。未来的研究重点将放在共培养前后急性髓系白血病细胞中显著差异糖链的生物学功能上,以了解N-糖链在骨髓微环境中所发挥的重要作用。