紫檀芪通过促进Nrf2核转移在调节髓核细胞炎症反应中的作用

摘要 : 紫檀芪(pterostilbene, PTE)是一种有效的抗炎抗氧化应激的天然药物, 但是其对椎间盘髓核细胞(nucleus pulposus cells, NPCs)的作用以及机制未知。该文培养SD大鼠原代NPCs, 采用CCK-8分析PTE的细胞毒性, ELISA、Real-time PCR和Griess方法分析PTE对IL-1β诱导的髓核细胞炎症反应的影响, Western blot、免疫荧光、NF-E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)siRNA转染等方法分析Nrf2在PTE抗炎中的作用。结果显示, 20 μmol/L PTE作用24 h对NPCs活力没有影响, PTE可以明显抑制IL-1β诱导产生的炎症介质一氧化氮(nitric oxide, NO)和前列腺素E2(prostaglandin E2, PGE2)的含量, 并抑制环氧酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)mRNA的水平(P<0.05)。Western blot结果显示, PTE促进细胞核中Nrf2的升高, 却导致胞质中Nrf2的降低(P<0.05)。免疫荧光亦显示, Nrf2从细胞质转移到细胞核。转染Nrf2 siRNA后, Western blot证实细胞核中Nrf2的下调。Nrf2下调后的NPCs中, PTE作用下分泌的NO和PGE2的含量以及COX-2和iNOS mRNA的水平相对正常细胞明显升高(P<0.05)。该研究结果提示, PTE可能通过促进NPCs中的Nrf2发生核转移导致下游一系列抗氧化应激基因的转录, 进而抑制IL-1β诱导的炎症反应。