siRNA抑制A375细胞中黑色素形成

摘要 : 以小干扰RNA(siRNA)技术抑制恶性黑素瘤细胞株A375的黑素皮质素受体1(melanocortin-1-receptor， MC1R)、小眼球相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor， MITF)基因表达， 从而抑制细胞黑色素的生成。通过RT-PCR检测MC1R、MITF、酪氨酸酶(tyrosinase， TYR)、酪氨酸酶相关蛋白l(tyrosinase related protein-1， TRP-1)基因mRNA水平的变化， 通过测定黑色素含量的变化检测蛋白水平的改变。并用台盼蓝活细胞计数法检测其对细胞增殖的影响。经RT-PCR检测， 特异性siRNA作用的靶基因显著下调， 黑色素含量明显降低。细胞增殖的变化说明， 脂质体包裹的siRNA对A375细胞的毒性远小于熊果苷等化学合成药物。结果显示， 利用siRNA对A375细胞中靶基因的调控， 有效的抑制了黑色素的生成， siRNA技术与传统的调控黑色素的方法(化学合成物——褪色剂)比较， 具有用量小、抑制效率高、细胞毒性低等优点。同时， 为进一步研究黑色素形成通路中各基因之间的的关系提供了新思路。