沉默信息调节因子3促进肝癌细胞凋亡及其机制研究

摘要 : 该文旨在探讨沉默信息调节因子3(sirtuin 3, SIRT3)对肝癌细胞凋亡的影响, 并研究SIRT3调节肝癌细胞凋亡的分子机制。运用流式细胞术检测SIRT3过表达对肝癌细胞系(SMMC-7721和SK-Hep-1)凋亡的影响; 通过siRNA靶向沉默SIRT3并检测SIRT3沉默对肝癌细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)分析SIRT3对Bcl-2家族成员mRNA水平的影响, 筛选受SIRT3调节的Bcl-2家族成员; Western blot进一步检测SIRT3对目标Bcl-2家族成员蛋白水平的影响; 流式细胞术分析目标Bcl-2家族成员在SIRT3诱导肝癌细胞凋亡中的作用。结果显示, SIRT3过表达促进肝癌细胞凋亡并引起Bax mRNA和蛋白水平升高; SIRT3沉默抑制肝癌细胞凋亡, 同时也抑制Bax蛋白水平表达, Bax沉默显著减少了SIRT3过表达细胞中的凋亡数目。该研究结果提示, SIRT3通过凋亡调节基因Bax诱导肝癌细胞凋亡。