ZnCl2阻断电压门控质子通道对缺氧后小胶质细胞产生活性氧及促炎因子的影响

摘要 : 为明确电压门控质子通道(voltage-gated proton channel, Hv1)对小胶质细胞的影响, 研究了Hv1在正常、激活及抑制后对小胶质细胞活性氧、促炎因子产生的影响及机制, 该研究使用原代培养的小胶质细胞, 利用免疫荧光染色明确Hv1表达。用Hv1非特异性抑制剂ZnCl2阻断该通道, 用DCFH-DA染色、Real-time PCR观察糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation, OGD)处理后小胶质细胞产生活性氧(reactive oxygen species, ROS)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)水平的变化。采用Western blot检测Hv1和Nox2蛋白质水平。实验结果显示, 小鼠脑部小胶质细胞可检测到Hv1通道的表达; 单纯ODG组缺氧后小胶质细胞ROS、TNF-α、IL-1β的产生明显增加; 而OGD加ZnCl2干预组, 小胶质细胞ROS、TNF-α、IL-1β的产生较单纯OGD组显著降低; Western blot显示, OGD导致小胶质细胞中Hv1和Nox2蛋白质水平显著增加。以上结果表明, 小鼠脑部小胶质细胞存在Hv1通道蛋白质, ZnCl2阻断该通道可降低OGD诱导的小胶质细胞ROS和TNF-α、IL-1β的产生, 该抑制作用可能与其抑制NADPH氧化酶的作用相关。