利用CRISPRi干扰研究MyoG和Myf6基因对利用CRISPRi干扰研究MyoG和Myf6基因对

摘要 : CRISPR干扰(clustered regularly interspaced short palindromic repeat interference, CRISPRi)技术因高效的基因干扰效率而成为基因功能研究的重要工具。MyoG、Myf6基因是生肌调节因子家族(myogenic regulatory factors, MRFs)的重要成员, 是骨骼肌分化所必需的调控因子。该研究以牛骨骼肌卫星细胞为实验材料, 探讨MyoG和Myf6基因在骨骼肌卫星细胞分化过程中的相互关系。构建MyoG、Myf6基因CRISPRi载体, 分别转染牛骨骼肌卫星细胞, 诱导其分化, Real-time PCR检测肌肉分化重要功能基因MyoG、Myf6、MYH2、MyoD的表达情况。结果表明, 在牛骨骼肌卫星细胞分化期间, 抑制MyoG基因表达将诱导Myf6基因的代偿性升高, 但并不能完全弥补MyoG基因的缺少对肌肉分化产生的影响, 而抑制Myf6基因表达则不会引起MyoG基因表达升高, 这为肌肉分化机制的阐明提供了理论依据。