改变IFT57表达水平对结肠癌SW480细胞增殖的影响及其分子机制

摘要 : IFT57是一种纤(鞭)毛内转运蛋白, 其功能与信号通路的转导相关。该研究通过改变IFT57表达水平后, 观察其对结肠癌SW480细胞增殖能力的影响, 探讨IFT57基因改变SW480增殖能力的分子机制。首先, 构建IFT57过表达及干扰质粒, 分别转染结肠癌SW480细胞株后, 采用Realtime PCR及Western blot技术检测Hedgehog信号通路关键转录因子Gli1、主要靶基因CyclinD1的表达水平变化; 采用CCK-8法及BrdU法检测SW480活性及增殖能力的情况。成功构建了IFT57高表达质粒及3个shRNA质粒并筛选出干扰效率最高的1个(P<0.05)。将IFT57过表达质粒转染SW480细胞株后, Hedgehog信号通路活性升高, 细胞活性和增殖能力增强(P<0.05); 当沉默IFT57表达后,Hedgehog信号通路活性下降, 细胞的活性及增殖能力降低(P<0.05)。以上结果提示, IFT57表达水平可影响结肠癌SW480细胞株活性及增殖能力, 其可能机制是通过调控Hedgehog信号通路活性来影响SW480细胞的增殖活力。