全内角反射技术与转盘式共聚焦技术在细胞膜表面的成像比较

于文颖¹ 耿广峰¹ 张辰² 陈婷¹ 梁昊岳¹ 程雪莲¹ 白杨¹ 杨晚竹^1*

¹中国医学科学院, 北京协和医学院血液病医院(血液学研究所), 实验血液学国家重点实验室, 天津 300020; ²天津医科大学总医院神经外科, 天津 300052

摘要 : 转盘式共聚焦成像是一种高速、高分辨率成像技术, 可以在高时间分辨率和空间分辨率的水平观察固定细胞内目标蛋白的分布及活细胞内目标蛋白的动态变化。全内角反射成像是一种观察距离玻片表面某个限定区域内蛋白质的分布和变化的成像技术, 常用于观察固定细胞以及活细胞表面的亚细胞结构。该文以中性粒细胞和神经胶质瘤细胞作为观察对象, 通过观测固定细胞膜表面蛋白质的分布以及追踪膜标记活细胞的动态变化对两种成像方法进行了比较。结果发现, 就目前技术水平而言, 二者均可以采集到清晰的细胞边缘, 但全内角反射可以拍摄到更清晰的细胞膜表面结构, 它在动态拍摄过程中光漂白相对较低, 在快速捕捉过程中能够更加全面的捕捉到一个完整的运动过程。