炎症状态下高脂通过NPC1介导内质网应激致足细胞损伤机制研究

摘要 : 该研究观察了炎症状态下高脂介导的内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)在足细胞损伤中的作用, 并探讨了胞内胆固醇转运蛋白C型1类尼曼−匹克蛋(Niemann-pick C1 protein, NPC1)介导脂质紊乱致ERS的分子机制。将足细胞分为对照组、高脂组(low-density lipoprotein, LDL)、高脂+炎症因子组(LDL+IL-1β)、衣霉素干预组(TM) 、4-苯基丁酸(4-PBA)干预组、辛伐他汀干预组(Statin)。流式细胞术检测足细胞凋亡, 油红O染色检测足细胞胞内脂质沉积,荧光定量PCR检测NPC1、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78, GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase, PERK)和活化转录因子6(activating transcription factor 6, ATF6) mRNA水平; 荧光免疫技术分析GRP78的表达。结果表明, 在高脂基础上, 随炎症因子浓度增大和处理时间延长, 足细胞的凋亡率明显上升。胞内脂质沉积以及GRP78、PERK、ATF6、NPC1 mRNA的表达在高脂加炎症因子组明显上升。与高脂加炎症因子组比较, 小剂量衣霉素预处理和4-PBA能降低细胞凋亡比例, 降低GRP78、PERK和ATF6 mRNA的表达, 且4-PBA明显减弱GRP78荧光表达。辛伐他汀和4-PBA可以降低胞内脂质沉积和NPC1 mRNA的表达。以上结果说明, 炎症状态下脂质可能通过NPC1过度转运到内质网并诱发ERS引起足细胞损伤, 缓解内质网应激和降低胞内脂质沉积能减轻足细胞损伤。