双亮氨酸模体对NOK/STYK1蛋白的表达及细胞内分布特征的影响

摘要 : NOK(novel oncogene with kinase domain)蛋白是一种新的在结构上比较独特的受体型酪氨酸蛋白激酶家族(protein tyrosine kinases, PTKs)成员, 具有较强的促肿瘤形成及转移的能力, 并参与细胞的内吞过程。基因结构序列分析结果表明, 在NOK氨基酸序列中存在多处双亮氨酸模体(di-leucine motif)。有研究表明, 双亮氨酸模体在细胞的内吞、膜泡运输以及细胞信号分拣等过程中具有重要作用。为此, 该研究构建了一系列NOK蛋白双亮氨酸模体突变体, 并在HeLa细胞中分析了其蛋白质表达水平及细胞内分布特征。结果表明, NOK蛋白的不同双亮氨酸模体的突变可导致NOK蛋白在细胞中表达量的改变。与对照相比, NOKL220P表达量明显提高, 而NOKL237P表达量降低。从NOK蛋白在细胞内的分布特征来看, 不同双亮氨酸模体的突变同样会引起NOK蛋白在细胞内分布的改变, 包括NOK蛋白形成聚集体的细胞比例、在细胞中的分布位置以及聚集体的大小和数量的不同。特别是NOKL203P、NOK237P以及L299P三个位置的突变可以显著地降低NOK蛋白在细胞中的聚集。不仅如此, 过量表达NOKL41P还表现出了更为明显的核膜定位特征, 而L220P则表现出了更为明显的质膜定位特征。由此说明, NOK的不同双亮氨酸模体对其蛋白质表达水平以及在细胞内的定位分布具有重要的调节作用, 该研究为阐明NOK蛋白促肿瘤形成及转移的分子机理提供了新的见解。