Purα蛋白质不同结构域对APP基因表达的调控作用

李永玲^2# 贾中发^2# 柴娟¹ 李平² 袁程敏¹ 孙涛¹ 崔建奇^1,2*

¹宁夏医科大学颅脑疾病重点实验室, 省部共建国家重点实验室培育基地, 银川 750004;
²宁夏医科大学基础医学院, 银川 750004

摘要 : 该研究将构建的含淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein, APP)基因启动子的萤火虫荧光素酶报告质粒与Purα全长基因或含不同结构域的Purα缺失突变体共转染到U87MG细胞中, 进行萤火虫荧光素酶活性测定, 以确定Purα对APP基因表达的调控作用。同时, 将Purα全长基因及含有不同结构域的Purα缺失突变体的真核表达载体分别转染至U87MG细胞, 使目的蛋白过表达, 通过实时定量PCR(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)研究Purα不同的结构域对APP基因在转录、翻译水平的调控作用。结果显示, Purα全长蛋白及其不同结构域对APP基因表达均有不同程度的抑制作用, 但至少保持N-端或C-端的结构域可能是维持Purα蛋白功能的必要条件。