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H2O2通过钙稳态失调诱导小鼠胚胎肝细胞凋亡


赵 培1 闫晓风2 王晓玲2*
1上海中医药大学教学实验中心, 上海 201203;
2上海中医药大学基础医学院生物教研室, 上海 201203
摘要 : 该文研究了体外培养肝细胞内钙离子浓度改变对细胞存活率、凋亡和增殖的影响。建立了H2O2诱导小鼠胚胎肝细胞损伤模型, CCK-8检测细胞存活率, Fura-2/AM负载检测细胞内[Ca2+]i; 免疫荧光和Western blot分别检测STIM1和Orai1在细胞内的定位和含量; 流式细胞术检测细胞凋亡; Brdu掺入检测细胞增殖。结果显示, H2O2刺激后细胞存活率降低为对照组的73%, 凋亡细胞比例增加, 增殖细胞数目显著减少, 细胞内[Ca2+]i升高, STIM1和Orai1蛋白质水平增加, 且STIM1可与Orai1蛋白质共定位。2-APB预处理组可以降低细胞内[Ca2+]i, 减少STIM1和Orai1蛋白质表达水平, 抑制STIM1和Orai1蛋白质的相互作用。结果表明, H2O2可通过影响细胞内钙离子稳态导致细胞凋亡。