胰高血糖素样肽-1类似物活性检测的CHO细胞模型构建

摘要 : 该文构建了一种胰高血糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1, GLP-1)类似物活性检测的细胞模型, 为GLP-1类似物的药物筛选提供了一种简单可靠的评价方法。真核表达质粒pcDNA3.1/hGLP-1R转染至中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary, CHO), 经单克隆筛选和遗传霉素(G418)压力筛选最终筛选出6株单克隆菌株。流式细胞仪检测GLP-1受体(glucagon-like peptide-1 receptor, GLP-1R)的表达量, 最终筛选获得1株高表达的细胞模型(CHO/pcDNA3.1/hGLP-1R)。RT-PCR结果显示, 该细胞模型转录hGLP-1R基因; 流式细胞仪检测结果和激光共聚焦结果显示, 细胞模型的膜表面有hGLP-1R蛋白的表达。连续传代10次, 细胞膜表面的hGLP-1R蛋白表达没有变化。构建的细胞模型活性检测结果显示, 该细胞模型可以很好地用于GLP-1类似物的活性检测。综上所述, 该细胞模型为GLP-1类似物的活性检测建立了一种方便可靠的体外活性检测方法。