仔猪睾丸支持细胞的体外生物学特性研究

摘要 : 为研究仔猪睾丸支持细胞生物学特性, 以3~5周龄仔猪睾丸为材料, 优化消化和差异贴壁方法, 分离纯化支持细胞, 研究其体外培养特性包括增殖活力、标志分子和细胞因子的表达。结果显示, 先以0.25%胶原酶IV和0.1%透明质酸酶消化60 min, 再以0.25%胰蛋白酶和0.1% DNase I消化20 min, 有利于获得支持细胞; 支持细胞接种后贴壁时间主要集中在3~5 h; 纯化后细胞胞体宽大, 呈梭形或不规则形; GATA4染色呈阳性, 碱性磷酸酶染色呈阴性; RT-PCR结果表明, 细胞表达GATA4、SOX9和INHB, 不表达CYP17、3β-HSD和α-SMA; ELISA结果表明, 细胞表达GDNF、LIF、CSF-1、EGF和FGF2, 符合支持细胞的基本特征。