大鼠BMSCs条件培养基对NSCs形态、生长及分化的影响

摘要 : 通过对SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs)及新生鼠神经干细胞(neural stem cells, NSCs)进行体外分离、培养及鉴定后, 观察BMSCs条件培养基对NSCs向神经细胞分化的影响。采用全贴壁培养法培养BMSCs, 并采用流式细胞术鉴定其特异性表面抗原标记。无血清技术培养NSCs, 采用免疫荧光技术鉴定其特异性抗原标记。BMSCs条件培养基(含10%胎牛血清的DMEM培养基)对NSCs诱导7 d后, 镜下观察细胞形态和生长, 并采用免疫荧光技术检测NSCs分化。BMSCs高表达CD90、CD29(>90%), 而CD45呈阴性表达。免疫荧光染色显示, NSCs标记蛋白Nestin、SOX2为阳性。NSCs经BMSCs培养液诱导分化7 d后经免疫荧光鉴定, MAP-2及GFAP呈阳性,阳性率分别为73.80%和50.47%; NSCs经胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)诱导分化7 d后经免疫荧光鉴定, MAP-2及GFAP呈阳性, 阳性率分别为42.14%和31.90%。BMSCs条件培养基可诱导NSCs分化为神经元及星形胶质细胞, 其中BMSCs分泌的细胞因子在诱导分化中可能发挥重要作用。