shRNA介导DEPDC7基因沉默对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭及迁移能力影响的研究

摘要 : 功能未知基因DEPDC7(DEP domain containing 7)是从基因芯片数据挖掘得到的, 基因表达谱提示只在肝组织中选择性高表达, 但是关于DEPDC7在肝癌细胞内参与的生命活动及其分子机制的相关研究报道较少。该研究应用RNAi技术构建DEPDC7慢病毒载体并感染人肝癌细胞株HepG2, 利用RT-qPCR和Western blot方法检测DEPDC7干扰效果。运用噻唑蓝(MTT)比色法和克隆形成方法检测细胞增殖能力, 流式细胞术检测细胞周期变化, Transwell小室检测细胞侵袭迁移能力。结果显示, 成功构建的DEPDC7慢病毒载体可以有效干扰DEPDC7 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。此外, DEPDC7被沉默后, 可以有效促进细胞周期从G1期向S期转变, 细胞增殖和侵袭迁移能力均显著提高(P<0.05)。该研究提示, 肝癌细胞HepG2中DEPDC7低表达能有效提高细胞增殖、克隆形成和侵袭迁移能力, 为后续研究DEPDC7转录调控机制等指明了方向。