Caveolin-1对OGD/R人脐带血内皮祖细胞中VEGF表达的影响

摘要 : 通过探讨caveolin-1对氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation, OGD/R)人脐带血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)的影响, 为caveolin-1在脑缺血缺氧性疾病中的应用提供实验依据。采用密度梯度离心法获取脐带血单个核细胞, 接种在鼠尾I型胶原包被的培养板中, 用内皮细胞培养液EGM-2培养, 观察EPCs生长情况, 通过观察细胞形态、双荧光染色法、免疫荧光细胞化学染色法及流式细胞仪等技术对培养的EPCs进行鉴定。选取EPCs高表达的时间点, 构建针对caveolin-1基因的RNA干扰真核表达质粒, 建立基因沉默和OGD/R模型, 随机分为正常对照组、OGD/R组、caveolin-1基因沉默组、caveolin-1基因沉默OGD/R组。免疫荧光法和Western blot检测caveolin-1及VEGF的表达。人脐带血可分离获得内皮祖细胞; 成功构建caveolin-1基因沉默模型; caveolin-1及VEGF的表达在caveolin-1基因沉默组显著低于正常对照组(P<0.01); OGD/R组caveolin-1及VEGF表达明显高于正常对照组(P<0.01); OGD/R组caveolin-1及VEGF表达明显高于caveolin-1基因沉默OGD/R组(P<0.01); caveolin-1基因沉默组caveolin-1和VEGF表达量高于caveolin-1基因沉默OGD/R组(P<0.05)。以上结果表明, caveolin-1能够影响OGD/R的EPCs中VEGF的表达, 是促进血管细胞损伤修复的可能因素之一。