分枝菌酸诱导巨噬细胞泡沫细胞化对细胞自噬的影响

摘要 : 研究分枝菌酸(mycolic acid, MA)诱导的巨噬细胞泡沫细胞化对巨噬细胞自噬的影响, 探讨MA促巨噬细胞泡沫细胞化的机制。构建LC3真核表达质粒(pEGFP-LC3B), 转染RAW264.7细胞后获得其稳定转染细胞株(RAW264.7/pEGFP-LC3B); 用MA诱导RAW264.7/pEGFP-LC3B获得RAW264.7/pEGFP-LC3B泡沫细胞。实验分为三组: RAW264.7细胞组、RAW264.7/pEGFP-LC3B细胞组及MA诱导的RAW264.7/pEGFP-LC3B泡沫细胞组。通过RT-PCR法检测各组细胞中自噬相关基因Becn1、LC3B的转录水平, Western blot法检测各组细胞自噬标志蛋白LC3B II/I的表达水平。RTPCR检测结果显示, RAW264.7/pEGFP-LC3B泡沫细胞组的Becn1基因及LC3B基因的转录水平明显较其他两组低(P<0.05)。Western blot检测结果显示, RAW264.7/pEGFP-LC3B泡沫细胞组LC3B II/I比值明显较其他两组低(P<0.05)。由此可见, 当巨噬细胞被MA诱导成为泡沫巨噬细胞后, 其自噬功能显著降低。该研究证明, MA可能通过抑制巨噬细胞自噬, 引起脂代谢失衡, 进而发生巨噬细胞泡沫细胞化。