MFRN1过表达对293T细胞生长及线粒体功能的影响

杨宇¹ 陈琳¹ 张小勤¹ 张柳¹ 章万林¹ 施孟如^1,2,3 吕建新^1,2,3* 李伟^1,2,3*

¹浙江省医学遗传学重点实验室, 温州 325035; ²检验医学教育部重点实验室, 温州 325035; ³温州医科大学检验医学院、生命科学学院, 温州 325035

摘要 : Mitoferrin-1(MFRN1)是溶质携带蛋白家族的一员, 是线粒体内膜上最主要的铁运输蛋白。为了观察MFRN1过表达对293T细胞生长及线粒体功能的影响, 采用包装慢病毒和感染293T细胞的方法构建MFRN1稳定过表达的细胞模型(293T-MFRN1), 并对其线粒体功能进行评价。构建的稳定细胞株293T-MFRN1中MFRN1转录水平及蛋白表达水平显著增加(P<0.01), MFRN1过表达细胞线粒体内总铁的含量明显增加(P<0.05); 电镜显示线粒体结构损伤, 线粒体嵴减少、空泡化; 线粒体能量代谢受抑制, 细胞ATP含量显著下降, 腺苷酸池总量(ATP+ADP+AMP)比对照组减少约40%; 细胞生长受到抑制, 在细胞培养48 h后高表达组细胞数量显著低于对照组; 细胞内羟自由基(·OH)含量增加; 线粒体DNA发生明显的氧化损伤。以上表明, MFRN1表达量的稳定对细胞功能极为重要, 表达量异常增加将导致细胞线粒体功能障碍、细胞增殖抑制。