肝星形细胞分泌的趋化因子CXCL1在肝癌转归中的作用

摘要 : 该文探讨了人肝星形细胞(hepatic stellate cells, HSC)对肝癌细胞(HepG2、SMMC-7721)的迁移、侵袭能力和上皮–间质转化(epithelial-msenchymal transition, EMT)的影响及其机制。采用条件培养法培养肝癌细胞, 利用细胞划痕和Transwell实验分析肝星形细胞对肝癌细胞的迁移和侵袭作用。Western blot分析肝星形细胞自身及其分泌到培养液中趋化因子CXCL1[chemokine (C-X-C motif) ligand 1]和肝癌细胞的CXCL1受体2—CXCR2(CXCL1 receptor 2)的表达量, 以及条件培养下肝癌细胞中p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β和Snail的表达变化。激光共聚焦显微术和Western blot检测肝癌细胞上皮标志物E-cadherin、间质标志物N-cadherin和Vimentin的表达变化。结果显示, 在HSC中大量表达并分泌趋化因子CXCL1, 而肝癌细胞HepG2、SMMC-7721中高表达CXCR2。肝癌细胞通过条件培养后, 细胞形态改变, 细胞黏附下降, 细胞迁移和侵袭能力增强, 上皮标志物E-cadherin蛋白表达下调、间质标志物N-cadherin蛋白和Vimentin蛋白表达上调, PI3K/AKT信号通路中的关键成员PI3K和AKT磷酸化水平上调, p-GSK-3β和转录因子Snail表达上调。在肝癌细胞条件培养下加入CXCR2受体的特异性抑制剂(SB265610)后, 肝癌细胞上皮标志物E-cadherin蛋白表达上调、间质标志物N-cadherin蛋白和Vimentin蛋白表达下调, p-PI3K、p-AKT、p-GSK-3β和Snail的表达下调。以上结果说明, 肝星形细胞可能通过CXCL1/CXCR2轴活化PI3K/AKT信号通路并最终促进肝癌细胞上皮–间质转化。