TRBP2基因过表达对肺腺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭的影响及可能机制

摘要 : 该文探讨了TAR RNA结合蛋白2(TAR RNA binding protein 2, TRBP2)基因对肺腺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭的影响及可能机制。构建TRBP2慢病毒过表达载体, 以不同感染复数(MOI)感染A549细胞, 根据绿色荧光强度选择最适MOI值。荧光定量PCR(FQ-PCR)检测TRBP2、MMP-2(matrix metalloproteinase-2)、PKR(double-stranded RNA-dependent protein kinase) mRNA的表达量。免疫蛋白印记(Western blot)法检测TRBP2、MMP-2、PKR、p-PKR的表达。采用MTT法、平板克隆实验检测TRBP2基因对A549细胞增殖的影响, Transwell迁移及侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力, 黏附实验检测同种细胞和异种细胞间黏附情况。结果发现, 成功构建了TRBP2基因过表达的A549细胞株, 与空载体组和对照组比较, TRBP2基因过表达组细胞侵袭、迁移能力明显增强(P<0.05), 同种细胞间黏附力减弱(P<0.05)而异种细胞间黏附力增强(P<0.05), 增殖速度加快(P<0.05)及克隆形成率增加(P<0.05)。此外, MMP-2、TRBP2蛋白及mRNA表达量明显升高(P<0.05); p-PKR蛋白表达量降低(P<0.05); PKR蛋白及mRNA表达量无差异。对照组与空载体组之间比较, 以上各项指标均没有明显差异(P>0.05)。该研究表明, 过表达TRBP2基因可能通过促进MMP-2的表达同时抑制PKR磷酸化来促进肺腺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭。