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比较体外扩增调节性T细胞的两种方法


刘 钊 罗诗樵*
重庆医科大学附属第一医院肝胆外科, 重庆 400016
摘要 : 利用免疫磁珠法(immunomagnetic beads, MACS)从BALB/c小鼠脾脏中分别分离出CD4+CD25+Tregs(regulatory T cells)和CD4+T细胞, CD4+CD25+Tregs加入anti-CD3/CD28磁珠与1 000 U/mL IL-2体外扩增14 d; CD4+T细胞加入anti-CD3/CD28磁珠、100 U/mL IL-2和5 ng/mL重组人源性转化生长因子-β(transforming growth factor-β, TGF-β)体外扩增5 d。分析两种方法扩增后Tregs免疫抑制功能及数量。结果显示, 两种方法扩增的Tregs免疫抑制功能无明显差别(P>0.05), 但是分别从大小相当的BALB/c小鼠脾脏所提取出的细胞中, 通过CD4+T细胞扩增5 d可以得到(4.9±0.4)×107 Tregs, 而通过CD4+CD25+Tregs扩增14 d只能得到(1.9±0.1)×107 Tregs(P<0.05)。结果发现, 通过两种方法扩增得到的Tregs免疫抑制功能无明显差异, 但是通过CD4+T细胞扩增Tregs方法所需时间短, 而且得到的细胞数量多。