低氧诱导因子-1α对SH-SY5Y细胞兴奋性毒性损伤的调节作用

摘要 : 探讨低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)在喹啉酸诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤中的作用。将体外培养的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞分为对照组、喹啉酸低、中、高剂量组及HIF-1α抑制剂二甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol, 2ME2)预处理喹啉酸高剂量组, 采用噻唑蓝还原法和乳酸脱氢酶漏出率检测法测定细胞损伤程度, Hoechst 33342单荧光染色法观察细胞凋亡, 免疫荧光染色法检测HIF-1α在细胞内的表达, 免疫印迹法检测细胞HIF-1α、蛋白激酶B(protein kinase B, Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、Bcl-2和Bax的表达。结果显示, 喹啉酸可剂量、时间依赖性地诱导SH-SY5Y细胞损伤, 导致细胞凋亡。同时, 喹啉酸可使SH-SY5Y细胞HIF-1α表达上调并发生核转位、p-Akt表达增加及Bax/Bcl-2表达比例增加, 而2ME2可抑制喹啉酸诱导的SH-SY5Y细胞损伤及降低HIF-1α、p-Akt和Bax/Bcl-2的表达。由此说明, HIF-1α/Akt通路介导了喹啉酸诱导SHSY5Y的细胞凋亡。HIF-1α抑制剂(2ME2)能够减轻喹啉酸致SH-SY5Y细胞损伤程度, 减少细胞凋亡。