脂氧素对粒细胞集落刺激因子表达的影响及其机制初探

摘要 : 体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7， 实验分为空白组、脂多糖(LPS)组(1 mg/L LPS)及脂氧素A₄(LXA₄)处理组(1 mg/L LPS与0.1~1 000 nmol/L LXA₄共同温育)。处理预设时间后， 实时荧光定量聚合酶链反应和酶联免疫吸附实验分别检测粒细胞集落刺激因子(G-CSF)基因表达和蛋白质分泌水平， 免疫印迹法检测IκB_α降解和NF-κB转位情况， 荧光素酶报告质粒检测NF-κB转录活性。结果表明: LPS诱导G-CSF表达(P<0.01)，LXA₄抑制G-CSF基因表达和蛋白质分泌，其中10 nmol/L LXA₄作用最明显(抑制率为39.8% )(P<0.01); 10 nmol/L LXA₄明显抑制IκB_α降解(P<0.05)、NF-κB转位(P<0.05)以及NF-κB的转录活性(P<0.05)。这提示LXA₄可能通过抑制NF-κB的转位和转录活性而抑制LPS诱导RAW264.7巨噬细胞分泌G-CSF。